試驗成立條件﹕轉印在標準布上試驗菌數(shù)達到 １﹒０×１０６ 個以上，增殖值（±０﹒５ 以內）Ｆ＝Ｍｃ－ Ｍｄ﹒Ｍｄ 為剛轉印標準布上的生菌數(shù)對數(shù)值﹔Ｍｃ 為在試驗布上培養(yǎng) １-４ｈ 后生菌數(shù)的對數(shù)值﹒
２ ＡＴＰ（生物發(fā)光法）測定細菌數(shù)
紡織品上細菌含量測定已沿用 １００ 多年，采用將試樣上沖洗菌液，在瓊脂上培養(yǎng)?（３７±１）℃，（２４￣４８）ｈ后，再測定數(shù)量，操作繁雜且費時，精度不高﹔而用 ＡＴＰ（生物發(fā)光法）測定，省時、省力，在技術上是一大進步﹒
利用熒光蟲的熒光素 進行高靈敏度 ＡＴＰ 測定的原理早在 １９５０ 年已發(fā)現(xiàn)﹒近年來用基因重組技術完成了無性繁殖的微生物生產蟲熒光素 ，解決了蟲熒光素 性能穩(wěn)定性，而基因改性解決了“ 耐熱性”、“ 耐表面活性劑”等問題﹔去除樣本中游離 ＡＴＰ，從膜過濾改為 分解技術，解決了游離 ＡＴＰ 問題﹔采用低噪音、感度達 １０１３Ｍ、性能穩(wěn)定的光電倍增管光量測定儀元件，才使它成為許多領域中一項樂意采用的新技術﹒
日本纖維制品新功能評估協(xié)議會（ＪＡＥＥＴ）已將ＡＴＰ 測定法作為日本紡織品的抗菌性試驗法抗菌效果（ＪＩＳ Ｌ １０９２﹕２００２）中增加了一個新的細菌數(shù)測定方法，同時也向 ＩＳＯ 推薦采用﹒
ＡＴＰ（ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，三磷酸腺?。┦巧矬w內一種貯藏能源的化學物質，肌肉運動能源提供者，也是生物體產生各種物質的 反應能源﹒因此，有生命活動的地方一定有 ＡＴＰ 存在﹔反之，存在 ＡＴＰ 表示有生物存在的可能性﹒細菌細胞中也含有固定的 ＡＴＰ量，同一種細菌處于對數(shù)繁殖期和穩(wěn)定期其 ＡＴＰ 含量不同﹒細菌一旦死亡，ＡＴＰ 會被細胞內的分解 立刻分解殆盡﹒由此可測得樣本中 ＡＴＰ 濃度用它再除以各菌種不同狀態(tài)下每一個細菌的 ＡＴＰ 數(shù)量就可求得樣本中的活菌數(shù)﹒利用此原理可以方便測定制備試驗菌液以及培養(yǎng)后的活菌數(shù)﹒
ＡＴＰ 生物化學發(fā)光測定操作概要﹕（１）在 ＡＴＰ 試驗菌液（或接種菌液）以及沖洗的菌液中添加 Ａｐｙｒａｓｅ （腺 三磷酸雙磷酸?。┡c腺 胱氨 ，利用 分解將菌體外的游離 ＡＴＰ 去除﹔（２）在去除游離 ＡＴＰ 菌液中加入 ＡＴＰ 萃取劑進行萃取﹔（３）萃取后，加入由蟲熒光素和 Ｄ－ 蟲熒光素組成的發(fā)光試劑，然后用光電倍增管測定由 ＡＴＰ 和發(fā)光試劑反應發(fā)出的熒光光量，其反應式如下﹕
由發(fā)光量可求得 ＡＴＰ 濃度（ｍｏｌ／Ｌ），再用 ＡＴＰ 濃度除以如表 1 所示不同菌種在不同狀態(tài)下每一個細菌的 ＡＴＰ 量，即為樣本中活菌濃度（個／ｍＬ）﹒
表 1 各菌種每一細胞 ＡＴＰ 量
相關信息 
推薦企業(yè) 推薦企業(yè)
推薦企業(yè)
您所在的位置：
